1. ウイルスタイター（力価）が低い
考えられる原因
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挿入遺伝子が大きすぎる／複雑すぎる
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外来遺伝子が宿主細胞に毒性を示す
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ベクター設計（プロモーターや調節配列）が不適切
解決の方向性
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ベクターサイズを適正範囲に収める
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プラットフォームと相談し、ベクターシステムとの適合性を確認
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力価測定の方法や QC データを入手して比較
2. 感染効率が低い
考えられる原因
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標的細胞の種類や状態がレンチウイルスに適さない
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細胞内の抗ウイルス因子による影響
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機能性粒子の割合が少なく、空のカプシドが多い
解決の方向性
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標的細胞に適した条件や補助因子を検討（概念レベルで）
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細胞の健康状態を確認し、適切な対照を用いる
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機能的力価の検証データを供給元から入手
3. 細胞毒性や汚染
考えられる原因
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製造過程における不純物（細胞残渣、タンパク質、エンドトキシンなど）
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高力価ウイルスによる細胞毒性
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保存や輸送中の条件不良による劣化や汚染
解決の方向性
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無菌性やエンドトキシンに関する QC データを確認
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保存・輸送条件（温度、凍結融解回数など）を遵守
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実験時に陰性対照を用いて特異的効果と汚染を区別
4. 遺伝子発現の不安定化・サイレンシング
考えられる原因
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使用するプロモーターが標的細胞に適さない
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長期培養で外来遺伝子がメチル化され発現抑制
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必要な調節エレメントが不足
解決の方向性
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標的細胞に適したプロモーターを選択
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サイレンシング対策を施したベクター設計を確認
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長期発現をモニタリングする体制を整備
5. バッチ間のばらつき
考えられる原因
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製造プロセスや細胞状態の変動
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試薬やプラスミドのロット差
解決の方向性
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標準化された製造 QC データを確認
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内部対照を用いて、実験を単一バッチに依存しないようにする
PackGeneについて
PackGene Biotech is a world-leading CRO and CDMO, excelling in AAV vectors, mRNA, plasmid DNA, and lentiviral vector solutions. Our comprehensive offerings span from vector design and construction to AAV, lentivirus, and mRNA services. With a sharp focus on early-stage drug discovery, preclinical development, and cell and gene therapy trials, we deliver cost-effective, dependable, and scalable production solutions. Leveraging our groundbreaking π-alpha 293 AAV high-yield platform, we amplify AAV production by up to 10-fold, yielding up to 1e+17vg per batch to meet diverse commercial and clinical project needs. Moreover, our tailored mRNA and LNP products and services cater to every stage of drug and vaccine development, from research to GMP production, providing a seamless, end-to-end solution.
