AAV パッケージング – 研究グレード
- ミニプレップから精製AAVウイルスの作製まで、最短12日間でお届けします。
- 高純度、低エンドトキシン、かつ空のカプシド（空粒子）を最小限に抑えることで、信頼性の高いパフォーマンスを実現します。
- 100種類以上のセロタイプ（血清型）と専門家によるサポートをご用意し、5万件以上のプロジェクト成功実績に裏打ちされたサービスを提供します。
概要
アデノ随伴ウイルス（AAV）について — 遺伝子治療研究におけるゴールドスタンダードとされる理由
アデノ随伴ウイルス（AAV）は病原性のない一本鎖DNAウイルスであり、優れた研究ツールとして、また遺伝子治療や細胞治療における治療遺伝子（ペイロード）送達の主要な候補として台頭しています。アカデミアおよび産業界の研究者がAAVを好んでベクターに採用する理由には、以下の優れた特徴があります。
病原性のない安全性：AAVはヒトに対して病気を引き起こすことが知られておらず、in vivo（生体内）およびin vitro（試験管内）の遺伝子導入に最適な選択肢です。
低い免疫原性：AAVの感染によって引き起こされる免疫反応は非常に軽微です。そのため、高用量の投与や長期的な遺伝子発現が可能となり、研究グレードおよび臨床グレードの双方の用途において、標的外作用（オフターゲット効果）を最小限に抑えることができます。
広範な指向性（トロピズム）：ウイルスベクターの中でも非常にユニークな特徴として、AAVは分裂細胞と非分裂細胞の双方に効率よく感染できます。これにより、多様な組織や細胞タイプにおける有用性が大幅に向上します。
安定的かつ持続的な発現：組換えAAVベクターは、目的遺伝子（GOI）を宿主のゲノムに組み込むことなく長期的な遺伝子発現を誘導するため、安全性の懸念が極めて少なく、持続的な治療効果を可能にします。
セロタイプ（血清型）による組織特異性：多様なAAVセロタイプ間でカプシド（殻）の構造が異なるため、宿主の細胞タイプによって感染効率に偏り（バイアス）が生じます。これにより、遺伝子治療や研究用途において、特定の組織や細胞タイプを正確にターゲットにすることが可能です。
主な利点
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迅速な納品
AAV 5E+13GCの場合、12～15営業日 -
保証力価
≥1E+13GC/mL（qPCRゲノムコピー数/ml） -
高純度
SDS-PAGEで分析 -
高収率
最大1E+16GC -
低エンドトキシン
<10EU/ml、生体内実験に適しています -
低エンドトキシン
<30% -
複数の血清型
70種類以上の血清型オプションをご用意 -
豊富な経験
10,000件以上のカスタムAAVプロジェクトを納品 -
経験豊富なテクニカルサポート
長年のAAV経験を持つ博士レベルのチーム
サービスの詳細
価格と納期
*記載された力価は、インサートがパッケージング容量（4.7 kb）を超える場合、またはご自身で改変した rep/cap プラスミドもしくはヘルパープラスミドを当社に提供される場合を除き、保証されます。
| AAV Packaging Serotypes | Guarantoed Yield (GC)* | Lead Time (Business Days) |
|---|---|---|
| Normal-yield AAV Serotypes | 2E+12 GC | 12-15 Days |
| 5E+12 GC | ||
| 1E+13 GC | ||
| 2E+13 GC | ||
| 5E+13 GC | ||
| 1E+14 GC | ||
| 2E+14 GC | 18-24 Days | |
| 5E+14 GC | ||
| 1E+15 GC | 30-45 Days | |
| 2E+15 GC | ||
| Low-yield AAV Serotypes (AAV4, 6, etc.) | 2E+12 GC | 12-15 Days |
| 5E+12 GC | ||
| 1E+13 GC | ||
| 2E+13 GC | ||
| 5E+13 GC | ||
| 1E+14 GC | 18-24 Days | |
| 2E+14 GC | ||
| 4E+14 GC |
- GC＝ゲノムコピー数（Genome copies）。
- 生産データのない極めて収量の低い AAV 血清型については、ここに記載された最終収量または力価を保証することはできません。
- 現在特許に係る AAV 血清型 を使用され、かつご応用が商業目的である場合、事前に特許所有者に連絡して許可を得ることをお勧めします。
保存要件:
- ウイルスは - 80℃で保存し、操作中は氷上に置いてください。
- 予想使用量を事前に計算し、ご要望に応じてウイルスを分注してください。これにより、受領後に不要な解凍と再凍結を避けるのに役立ちます。凍結融解サイクルはウイルスの生存能に影響を与えるためです。分注が必要な場合は、シリコン処理された内壁を持つ PCR チューブ、またはタンパク質結合率の低い特殊なウイルス保存チューブの使用を推奨します。
- 使用直前に、分注したウイルスを氷浴で融解してください。
- 必要に応じて PBS または PBS/0.001% F - 68 で希釈してください。
品質管理
PackGene の経験豊富な QC チームによって、多様な AAV ベースの QC アッセイ が開発されています。QC 試験は、in vitro および in vivo 研究の両方における AAV ウイルス粒子 の同一性、純度、および力価の検証を目的としています。AAV ゲノムコピー数は、力価較正のため ATCC の標準 AAV を用いた SYBR qPCR によって定量されます。純度は SDS - PAGE とクーマシーブルー染色によって決定されます。
当社は、AAV 粒子のエンドトキシンレベルが 10 EU/mL 未満であることを保証します。また、ddPCR、TEM、TCID50 力価測定などの追加 QC 試験やその他の QC サービスも提供しています。詳細については、AAV 分析サービスをご確認ください。
| Category | QC Assays | QC Standard |
|---|---|---|
| Identity | Identity – GOI Sequence | Additional QC |
| Purity | SDS-PAGE Coomassie Blue Staining | Free QC |
| TEM | Additional QC | |
| AUC | Additional QC | |
| Potency & Content | qPCR | Free QC |
| ddPCR | Additional QC | |
| TCID50 | Additional QC | |
| Capsid Titer-ELISA | Additional QC | |
| Impurity | Endotoxin Test | Free QC |
| Mycoplasma Detection | Additional QC | |
| Sterility Test | Additional QC | |
| Residual Plasmid Test | Additional QC |
パフォーマンス
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標準的品質管理（Standard QC）
- 複数の制限酵素を用いた制限酵素消化解析により、AAV パッケージングに使用するプラスミドを検証します。
- qPCR（定量のための標準曲線を用いた SYBR Green 法）による AAV 力価測定
注釈：AAV qPCR 力価測定の標準として ATCC VR-1816™が使用されました。- LAL アッセイによるエンドトキシン検査
- SDS-PAGE およびクーマシー染色による AAV 純度分析（要望に応じて銀染色も利用可能）
レーン 2 - 5 および 7：PackGene で生産された AAV サンプル。レーン 1、6：マーカー -
その他利用可能な分析試験（Other Available Analytical Tests）
関連サービス
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AAVパッケージングサービス
- AAVベクター用のフルレングスITR：生体内（in vivo）における高信頼性かつ持続的なトランスジーン発現のために、ITRの完全性を維持。
- 空カプシド（エンプティカプシド）の含有率を極めて低く抑えた、迅速かつ高品質なAAVベクター
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100種類以上のセロタイプ、40項目以上の品質管理（QC）アッセイ、そして精密なベクター設計技術
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50,000バッチ以上のAAV提供実績。GMP製造へのスムーズな移行をサポート
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AAV パッケージング – NHP グレード
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エンドトキシンフリーかつ厳格なコンタミネーション管理
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ddPCRによる力価定量とゲノム完全性の確認
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一貫した結果で安全性と有効性を向上
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AAV パッケージング – HT グレード
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最短7営業日での迅速な納期
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qPCRによる力価測定でコスト効率良好
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細胞培養での優れた性能を実現するために最適化
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