レンチウイルス(Lentivirus)ベクターについて

Nov 26 , 2025
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遺伝子工学や細胞生物学研究では、レンチウイルスベクターは目的遺伝子を哺乳類細胞のゲノムに安定的に組み込み、長期発現を実現するために広く使用されています。

1. レンチウイルスベクターの種類

レンチウイルスベクターは一般的に トランスファーベクター(Transfer vector)パッケージングプラスミド(Packaging plasmids) に分けられます。

(1) トランスファーベクター(Transfer Vector)

  • 最終的に目的遺伝子を運ぶベクターです。

  • 構造の特徴:

    • LTR(Long Terminal Repeat):ウイルスの両端にある長末端反復配列で、宿主ゲノムへの組み込みに必要。

    • ψ(Psi)パッケージングシグナル:RNAがウイルス粒子にパッケージされることを保証。

    • 選択マーカー:抗生物質耐性遺伝子(puromycin, neomycin)や蛍光タンパク質(GFP, mCherry)など。

    • プロモーター:目的遺伝子の発現を駆動(例:CMV, EF1α, PGK)。

  • 外来遺伝子を運ぶことができ、安定発現が可能。

(2) パッケージングプラスミド(Packaging Plasmids)

  • ウイルス組立に必要な構造タンパク質や酵素を提供します。

  • 第2世代レンチウイルスシステム

    • psPAX2:gag、pol、revを提供。

    • pMD2.G:VSV-G糖タンパク質を提供し、ウイルスのエンベロープと感染範囲を決定。

  • 第3世代レンチウイルスシステム

    • revを分離して別プラスミドにし、安全性を向上。

    • 通常は 3つのプラスミド に分かれる:

      1. gag/pol

      2. rev

      3. VSV-G

2. レンチウイルスベクターの特徴

  • 長期発現:レンチウイルスは宿主ゲノムに組み込まれ、安定発現を実現。

  • 非分裂細胞への感染:レトロウイルスと比べ、分裂細胞および非分裂細胞の両方に感染可能。

  • 中程度のベクターサイズ:一般的に 8–10 kb の外来遺伝子を搭載可能。

  • 安全性:第3世代システムはより安全で、再構成ウイルスのリスクを低減。

3. 応用例

  • 遺伝子過剰発現 / ノックイン

  • shRNA または CRISPR による遺伝子ノックダウン / ノックアウト

  • 幹細胞研究

  • がんモデルや免疫細胞改変

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