AAV の密度勾配超遠心では、主に ヨードキサノール(iodixanol)勾配 と CsCl(塩化セシウム)勾配 が使用されます。
それぞれでウイルスバンドの位置が異なります。
① ヨードキサノール密度勾配(最も一般的)
典型的な4層構成:15% / 25% / 40% / 60%
✅ AAVウイルス粒子のバンド:40% と 60% の境界付近
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AAV 粒子の密度は 約 1.4 g/mL
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そのため 40%(約1.32 g/mL)と 60%(約1.41 g/mL)層の境界に沈降する
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バンドは白濁した層として見える
📌 補足
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空カプシド(empty capsid):やや上層寄り(40%側)
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完全カプシド(full capsid):やや下層寄り(60%側)
※ ただし iodixanol では Empty/Full の完全分離は困難
② CsCl 密度勾配(Empty / Full の分離が可能)
✅ Full AAV(完全カプシド):密度 約 1.40 g/mL → より下層に形成
🌫️ Empty capsid(空カプシド):密度 1.32–1.35 g/mL → 上層に形成
観察されるバンド:
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上層:空カプシド(Empty)バンド
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下層:完全カプシド(Full)バンド(通常より明瞭)
CsCl は分離性能が高い一方、ウイルス活性低下のリスクがあるため、現在は iodixanol+クロマトグラフィーが主流。
PackGeneについて
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