AAV カプシド & エンプティカプシド お客様向け FAQ

Q1：AAV カプシド（Capsid）とは何ですか？

AAV カプシドとは、ウイルスの遺伝子を包むタンパク質の外殻であり、
感染する細胞・組織、感染効率、免疫原性を決定する重要な構成要素です。

Q2：AAV エンプティカプシド（Empty Capsid）とは何ですか？

エンプティカプシドとは、構造は完全であるものの、内部に目的遺伝子を含まない AAV 粒子を指します。
細胞内に侵入することはできますが、遺伝子発現は起こりません。

Q3：なぜ AAV パッケージング中にエンプティカプシドが発生するのですか？

主な原因は以下の通りです：

• 挿入遺伝子サイズが AAV の包装上限（約 4.7 kb）に近い、または超過している

• Rep / Cap 発現比率の不適合

• トランスフェクションやパッケージング条件の不安定

• 精製工程でエンプティカプシドとフルカプシドを十分に分離できていない

Q4：エンプティカプシドが多いと、どのような影響がありますか？

• 実際に有効な感染粒子数の低下

• 遺伝子発現効率の低下

• 実験再現性の低下

• in vivo 実験や臨床研究における 免疫反応リスクの増加

Q5：vg/mL が低くないのに、発現効果が弱いのはなぜですか？

vg/mL は 遺伝子を含むフルカプシド数のみを反映します。
エンプティカプシドの割合が高い場合、見かけのウイルス量は多くても、
実際に遺伝子を発現できる粒子は少ない可能性があります。

Q6：エンプティカプシドは検出できますか？

• qPCR：❌ エンプティカプシドは検出不可

• カプシド定量法（ELISA、TEM など）：✅ 検出可能

そのため、AAV の品質評価には 複数の分析手法を組み合わせることが重要です。

Q7：エンプティカプシドの割合を低減するにはどうすればよいですか？

• ベクター構造およびサイズの最適化（<4.7 kb）

• Rep / Cap 発現比率の調整

• 高効率 AAV パッケージングシステムの使用

• CsCl、AEX など、エンプティ／フルカプシド分離が可能な精製法の採用

• エンプティ／フル比率の定期的な品質管理

一文まとめ（お客様向け）

エンプティカプシドは遺伝子を含まない非機能性 AAV 粒子であり、その割合が高いと AAV の実際の効果低下および免疫リスク増加につながります。