AAV ベクター中の eGFP を mCherry に置き換えることはできますか？

Q1：AAV ベクター内の eGFP を mCherry に変更することは可能ですか？

はい、可能です。

eGFP と mCherry はどちらも一般的に使用される蛍光レポーター遺伝子であり、配列長がほぼ同等なため、AAV ベクターの基本骨格を変更することなく置き換えが可能です。

Q2：eGFP を mCherry に置き換えると、AAV の構造は変わりますか？

いいえ、基本構造は変わりません。

通常は発現カセット内の蛍光タンパク質コード配列のみを置き換え、他の要素はそのまま維持されます。

ITR – プロモーター – mCherry – WPRE – polyA – ITR

Q3：mCherry に変更すると、AAV の包装効率やウイルス力価に影響しますか？

通常、大きな影響はありません。

mCherry と eGFP の CDS 長は近いため、AAV ゲノム全長に与える影響は最小限であり、適切な設計条件下では包装効率や力価に影響しません。

Q4：mCherry は目的遺伝子と融合または共発現できますか？

はい、可能です。主な設計方法は以下の通りです。

• 融合発現：GOI-mCherry（タンパク質局在解析など）

• 2A 配列による共発現：GOI-P2A-mCherry（推奨）

• IRES による共発現：GOI-IRES-mCherry

Q5：mCherry の発現・観察タイミングは eGFP と異なりますか？

はい、若干異なります。

• mCherry は成熟にやや時間がかかります

• in vitro 実験では、感染後 48～72 時間での観察を推奨します

• 赤色蛍光は背景干渉が少なく、in vivo 実験に適しています

Q6：mCherry 発現には特別なプロモーターが必要ですか？

いいえ。

CMV、CAG、EF1α など一般的なプロモーターで問題なく発現します。ただし、弱いプロモーターや組織特異的プロモーターでは、蛍光強度が低く見える場合があります。

Q7：AAV のサイズ制限は考慮する必要がありますか？

はい。

mCherry に置き換えた場合でも、AAV ゲノム全長は 4.7 kb 以下を推奨しています。

Q8：AAV-mCherry のカスタム作製は可能ですか？

可能です。当社では以下のカスタムサービスを提供しています。

• AAV-eGFP から AAV-mCherry への変更

• 単一／複数遺伝子発現設計

• in vitro / in vivo 用最適化設計