AAV内毒素試験(AAV Endotoxin Testing)

Feb 06 , 2026
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1. AAV内毒素とは

AAV製造工程における内毒素は、主にグラム陰性菌由来のリポ多糖(LPS)に起因します。
主な混入経路は以下の通りです。

  • 大腸菌由来プラスミド調製工程

  • 細胞培養・精製工程

  • 試薬、水、実験環境からの汚染

AAV自体は非細菌性ウイルスですが、微量の内毒素でも実験結果や安全性に影響を及ぼす可能性があります。

2. AAV内毒素試験の重要性

内毒素レベルが高い場合、以下のリスクが生じます。

  • in vitro 実験:細胞毒性、炎症反応、非特異的遺伝子発現

  • 動物実験:発熱、免疫活性化、試験失敗

  • 臨床研究:被験者の安全性リスク

そのため、内毒素試験はAAV品質管理における重要な評価項目の一つです。

3. 主なAAV内毒素試験方法

現在、最も一般的に用いられている方法はLAL試験(リムルス試験)です。

  • ゲル化法

  • 比濁法

  • 発色法(クロマジェニック法)

特に発色法は高感度かつ再現性が高く、GMP製造にも広く採用されています。

4. AAV内毒素基準値(参考)

用途に応じた一般的な基準例は以下の通りです。

  • 細胞実験用AAV:≤ 5 EU/mL

  • 動物実験用AAV:≤ 1 EU/mL(または ≤ 0.5 EU/mL)

  • 臨床・GMPグレードAAV:投与量および投与経路に基づき算出(通常 ≤ 5 EU/kg)

5. 内毒素低減対策

  • 低内毒素プラスミドの使用

  • 内毒素管理された試薬・消耗品の採用

  • 精製工程(クロマトグラフィー、限外ろ過)の最適化

  • 出荷前の全ロット内毒素試験実施

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