なぜAAV-TEM解析を実施する必要があるのですか？

AAV-TEM解析（透過型電子顕微鏡：Transmission Electron Microscopy, TEM）は、アデノ随伴ウイルス（AAV）粒子の形態およびカプシド完全性を直接可視化評価するための重要な品質解析手法です。研究開発、製造プロセス最適化、品質管理（QC）において不可欠な役割を果たします。

1. ウイルス粒子が正しく形成されているかの確認

ウイルスゲノム滴度（gc/mL または vg/mL）が基準値を満たしていても、以下を保証するものではありません：

• 完全なカプシドが形成されているか

• 粒子の破損や構造異常がないか

• 凝集が発生していないか

TEMにより、AAV特有の二十面体構造を直接観察することで、構造的完全性を確認できます。

2. Empty/Fullカプシド比率の評価

AAV製造過程では、以下の粒子が混在します：

• Full capsid（充填カプシド）：ゲノムDNAを内包

• Empty capsid（空カプシド）：DNAを含まない

空カプシド比率が高い場合：

• 実効感染力の低下

• 動物試験における投与量設定の誤差

• 臨床開発上のリスク増大

TEMは形態学的に両者を識別でき、半定量的評価が可能です。

3. 滴度や発現効率異常の原因解析

以下のような状況においてTEM解析は有効です：

• 滴度は正常だが発現効率が低い

• 感染効率が不安定

• バッチ間差が大きい

• 凍結融解後に活性が低下

形態観察により、凝集、破損、異物混入などの有無を評価できます。

4. 製造プロセス最適化の支援

TEMは以下の検証にも活用されます：

• 精製方法の比較（例：ヨードキサノール密度勾配法 vs クロマトグラフィー法）

• 細胞破砕条件の検討

• 濃縮工程の影響評価

• 保存安定性試験

5. 品質管理および申請資料対応

前臨床研究およびGMP製造において、TEMデータは：

• ロットリリース補助試験

• 安定性試験データ

• IND申請資料

として広く活用されています。