AAVベクターのプロモーターはどのように選択すればよいですか？

AAV（アデノ随伴ウイルス）発現ベクターを構築する際、プロモーター（Promoter）の選択は、目的遺伝子の発現レベル、組織特異性、および発現の安定性に大きく影響します。一般的には、研究目的、標的組織、発現強度、およびAAVベクターの搭載容量などを総合的に考慮して選択する必要があります。

1. 発現範囲に基づく選択

（1）ユビキタスプロモーター（Ubiquitous promoter）

複数の細胞種や組織で広範な発現を必要とする場合に適しています。

代表的なプロモーター：

• CMV：高い発現レベルを示し、広く使用されていますが、一部の組織ではサイレンシングが起こる可能性があります。

• CAG：CMV enhancer と chicken β-actin promoter から構成され、強力かつ安定した発現が得られます。

• EF1α：比較的安定した発現が可能で、長期発現研究に適しています。

• CBh：CAG プロモーターの短縮型で、神経系研究に広く使用されています。

適用例：

• in vitro 細胞実験

• 全身性遺伝子発現研究

• 機能解析の初期検証

（2）組織特異的プロモーター（Tissue-specific promoter）

特定の組織または細胞タイプでの発現が必要な場合に推奨されます。
非標的組織での発現を低減することができます。

代表例：

• 神経系：hSyn、CamKII

• 心臓：cTnT

• 肝臓：TBG、Albumin

• 骨格筋：MCK、Desmin

• アストロサイト：GFAP

• 血管内皮細胞：VE-cadherin

2. 発現強度に基づく選択

一般的な発現強度の目安は以下の通りです：

CAG > CMV > EF1α > CBh > 組織特異的プロモーター

ただし、発現が強いほど常に最適とは限りません。
in vivo 実験では、過剰発現により細胞毒性や免疫応答が誘導される可能性があるため、場合によっては組織特異的プロモーターの使用が推奨されます。

3. AAVベクター容量に基づく選択

AAVの最大搭載容量は約4.7 kbであるため、プロモーターサイズも重要な設計要素となります。特に目的遺伝子サイズが大きい場合は注意が必要です。

代表的なプロモーターサイズ：

• CMV：約600 bp

• EF1α short：約250 bp

• CAG：約1.6 kb

• hSyn：約470 bp

• TBG：約800 bp

目的遺伝子サイズが大きい場合は、**ミニプロモーター（mini promoter）や短縮型プロモーター（short EF1α、CBhなど）**の使用が推奨されます。

4. 一般的なプロモーター選択の推奨例

• in vitro 発現検証：CMV または EF1α

• 神経科学研究：hSyn、CamKII、CBh

• 心臓研究：cTnT

• 肝臓研究：TBG

• 骨格筋研究：MCK

AAVベクター設計やプロモーター選択についてご不明な点がございましたら、標的組織、実験モデル、および発現要件に基づき、専門技術チームへご相談いただくことをお勧めします。