AAV プラスミドから AAV ウイルス粒子が作製される仕組み

Feb 04 , 2026
共有:

AAV プラスミドが AAV ウイルスになるとは、プラスミド自体が変化するのではなく包装細胞内で再構成され、ウイルス粒子として組み立てられる工程を指します。
一般的には 三プラスミド包装システムが用いられます。

1. 使用されるプラスミド構成

AAV の作製には、以下の 3 種類のプラスミドが必要です。

  1. AAV 発現プラスミド(Transfer plasmid)

    • 両端に ITR(逆位末端反復配列)を有する

    • 内部に目的遺伝子発現カセットを含む

    • 最終的にウイルスに封入されるのはこの配列のみ

  2. Rep/Cap プラスミド

    • Rep タンパク質:ITR 認識およびゲノム複製

    • Cap タンパク質:AAV カプシド形成(血清型を規定)

  3. Helper プラスミド

    • アデノウイルス由来の補助遺伝子(E2A、E4、VA RNA など)を供給

    • AAV 複製・包装に必要な細胞環境を提供

2. AAV ウイルス作製の流れ

  1. 包装細胞(主に HEK293 系)への共トランスフェクション
  2. Rep による ITR 配列認識と AAV ゲノム複製
  3. Cap タンパク質の発現とカプシド自己集合
  4. AAV ゲノムのカプシド内への選択的封入
  5. 細胞破砕によるウイルス粒子の回収
  6. 精製および品質管理(滴度、空カプシド率など)

3. 重要なポイント

  • ウイルスに封入されるのは ITR に挟まれた目的遺伝子配列のみ

  • Rep/Cap プラスミドおよび Helper プラスミドは 封入されない

  • 得られる AAV は 複製能を持たない組換え AAV である

PackGeneについて

PackGene Biotech is a world-leading CRO and CDMO, excelling in AAV vectors, mRNA, plasmid DNA, and lentiviral vector solutions. Our comprehensive offerings span from vector design and construction to AAV, lentivirus, and mRNA services. With a sharp focus on early-stage drug discovery, preclinical development, and cell and gene therapy trials, we deliver cost-effective, dependable, and scalable production solutions. Leveraging our groundbreaking π-alpha 293 AAV high-yield platform, we amplify AAV production by up to 10-fold, yielding up to 1e+17vg per batch to meet diverse commercial and clinical project needs. Moreover, our tailored mRNA and LNP products and services cater to every stage of drug and vaccine development, from research to GMP production, providing a seamless, end-to-end solution.

ダウンロード