三プラスミドシステム（third-generation lentiviral packaging system）と四プラスミドシステム（four-plasmid system）は、現在最も広く利用されているレンチウイルス包装方式であり、使用プラスミド数・遺伝子要素の分離度・安全性・ウイルスタイター・適用シーンなどに明確な差があります。
🔬 1．三プラスミド包装システム（第3世代：一般的で成熟）
📌 構成
| プラスミド | 役割 |
| Transfer vector（転移ベクター） | 目的遺伝子、蛍光蛋白、shRNA等を搭載（CMV・EF1αなどのプロモーター） |
| Packaging plasmid（包装プラスミド） | psPAX2が代表的。Gag/Pol/Rev/Tatを含み、構造・複製酵素生成を担う |
| Envelope plasmid（エンベローププラスミド） | 一般的にVSV-G（pMD2.G）。宿主域と感染性を決定 |
⭐ 特徴
| 利点 | 欠点 |
| 構成がシンプル、トランスフェクション効率が高い | Tat遺伝子が含まれるため、安全性は4プラスミドより一段低い |
| 高いウイルスタイターが得やすく、扱いが容易 | 細胞状態やベクターサイズにより滴度低下の可能性 |
🔬 2．四プラスミド包装システム（第2世代：より高い安全性）
📌 構成（遺伝子要素がさらに細分化）
| プラスミド | 役割 |
| Transfer vector（転移ベクター） | 目的遺伝子またはRNA発現カセットを搭載 |
| Gag/Pol plasmid | 構造蛋白・逆転写酵素など主要機能をコード |
| Rev plasmid | Revを単独発現、RNA輸送調節 → 遺伝子組換えリスク低減 |
| Envelope plasmid | VSV-Gまたは他のエンベロープ蛋白に置換可能 |
⭐ 特徴
| 利点 | 欠点 |
| Gag/PolとRevが分離 → 再構成リスクが低く最も安全 | システムが複雑で、トランスフェクション条件の最適化が必要 |
| 前臨床研究・遺伝子治療用途に適合 | 3プラスミドより滴度が低下する場合あり |
📊 総合比較
| 項目 | 三プラスミドシステム | 四プラスミドシステム |
| 安全性 | ★★★☆ | ⭐⭐⭐⭐⭐（最も高い） |
| ウイルスタイター | ⭐⭐⭐⭐（安定して高い） | ⭐⭐⭐（条件依存） |
| 実験操作性 | 容易・再現性良好 | やや複雑 |
| 推奨用途 | 一般研究、過剰発現、shRNA/CRISPR | 前臨床/体内投与・安全性重視研究 |
| 最大の違い | Gag/Pol/Rev/Tatが同一プラスミド | Gag/Pol・Revが分離 |
🌟 どちらを選ぶべきか？
| 研究シーン | 推奨システム |
| 通常の細胞実験・ウイルス産生を重視 | 三プラスミドで十分・滴度が高い |
| 生体内投与・臨床指向・安全性最優先 | 四プラスミドがより適切 |
PackGeneについて
PackGene Biotech is a world-leading CRO and CDMO, excelling in AAV vectors, mRNA, plasmid DNA, and lentiviral vector solutions. Our comprehensive offerings span from vector design and construction to AAV, lentivirus, and mRNA services. With a sharp focus on early-stage drug discovery, preclinical development, and cell and gene therapy trials, we deliver cost-effective, dependable, and scalable production solutions. Leveraging our groundbreaking π-alpha 293 AAV high-yield platform, we amplify AAV production by up to 10-fold, yielding up to 1e+17vg per batch to meet diverse commercial and clinical project needs. Moreover, our tailored mRNA and LNP products and services cater to every stage of drug and vaccine development, from research to GMP production, providing a seamless, end-to-end solution.
