四プラスミド方式は、現在広く用いられている安全性の高いレンチウイルス（Lentiviral Vector）生産システムであり、ウイルスの主要機能を4種類のプラスミドに分離することで、複製能ウイルスの再構成リスクを低減しつつ、高効率なウイルス粒子の産生を可能にします。
📌 4種類のプラスミド構成
1. トランスファーベクター（Transfer Plasmid）
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目的遺伝子（GOI）の発現カセットを搭載
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LTR–ψ（パッケージングシグナル）–プロモーター–GOI などで構成
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感染後の標的細胞で発現する遺伝子を規定する（例：GFP、shRNA、CRISPR要素など）
2. Gag/Pol 発現プラスミド
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ウイルス構造タンパク質 Gag を供給
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逆転写酵素・インテグラーゼなどを含む Pol を供給
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ウイルス粒子形成に不可欠な「骨格」を構築する
3. Rev 発現プラスミド
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Rev タンパク質 をコード
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未スプライスまたは部分スプライスのウイルスRNAを核外に輸送する役割
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レンチウイルス遺伝子の適切な発現および粒子生成に不可欠
4. エンベローププラスミド（Envelope Plasmid）
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最も一般的なのは VSV-G
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高い粒子安定性
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広範な宿主域
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組織特異的なトロピズムを得るため、他のエンベロープタンパク質にも置換可能
🧪 四プラスミドシステムの利点
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高い生物学的安全性：ウイルス構成因子を分散し、組換えリスクを大幅に低減
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高効率なウイルス産生：研究用・GMP準拠生産でも広く使用
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高い柔軟性：shRNA、gRNA、ORFなど、さまざまな遺伝子導入用途に対応
PackGeneについて
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