レンチウイルス パッケージ ング プラスミド

Dec 16 , 2025
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1️⃣ レンチウイルス作製に使うプラスミド構成

通常、3プラスミド系または4プラスミド系でパッケージングします。

🔹① トランスファープラスミド(Transfer plasmid)

  • 目的遺伝子(GOI)を含む

  • 代表的な要素:

    • 5’ / 3’ LTR

    • Ψ(パッケージングシグナル)

    • プロモーター(CMV、EF1α、PGK など)

    • レポーター(GFP、mCherry 等)

  • :pLenti、pLVX、pCDH など

👉 このプラスミドだけが最終的にウイルス粒子に入る

🔹② パッケージングプラスミド(Packaging plasmid)

ウイルス構造タンパクを供給(RNAにはならない)

主な遺伝子

  • gag:カプシド構造

  • pol:逆転写酵素・インテグラーゼ

  • rev:RNA核外輸送

代表例

  • psPAX2(最も一般的)

  • pCMV-dR8.2 dvpr

  • pMDLg/pRRE + pRSV-Rev(4プラスミド系)

🔹③ エンベローププラスミド(Envelope plasmid)

ウイルス表面タンパクを供給

  • 最も一般的:VSV-G

  • 代表例

    • pMD2.G

    • pMD.G

👉 VSV-Gにより広い細胞指向性高い安定性

2️⃣ 3プラスミド系 vs 4プラスミド系

構成 特徴
3プラスミド系 Transfer + psPAX2 + pMD2.G 簡単・高効率(一般的)
4プラスミド系 Transfer + gag/pol + rev + env 安全性が高い

3️⃣ 代表的な組み合わせ(例)

Transfer plasmid : pLenti-GOI

Packaging plasmid: psPAX2

Envelope plasmid : pMD2.G

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