1️⃣ レンチウイルス作製に使うプラスミド構成
通常、3プラスミド系または4プラスミド系でパッケージングします。
🔹① トランスファープラスミド(Transfer plasmid)
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目的遺伝子(GOI)を含む
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代表的な要素:
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5’ / 3’ LTR
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Ψ(パッケージングシグナル)
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プロモーター(CMV、EF1α、PGK など)
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レポーター(GFP、mCherry 等)
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例:pLenti、pLVX、pCDH など
👉 このプラスミドだけが最終的にウイルス粒子に入る
🔹② パッケージングプラスミド(Packaging plasmid)
ウイルス構造タンパクを供給(RNAにはならない)
主な遺伝子
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gag:カプシド構造
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pol:逆転写酵素・インテグラーゼ
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rev:RNA核外輸送
代表例
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psPAX2(最も一般的)
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pCMV-dR8.2 dvpr
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pMDLg/pRRE + pRSV-Rev(4プラスミド系)
🔹③ エンベローププラスミド(Envelope plasmid)
ウイルス表面タンパクを供給
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最も一般的:VSV-G
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代表例:
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pMD2.G
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pMD.G
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👉 VSV-Gにより広い細胞指向性と高い安定性
2️⃣ 3プラスミド系 vs 4プラスミド系
| 系 | 構成 | 特徴 |
| 3プラスミド系 | Transfer + psPAX2 + pMD2.G | 簡単・高効率(一般的) |
| 4プラスミド系 | Transfer + gag/pol + rev + env | 安全性が高い |
3️⃣ 代表的な組み合わせ(例)
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