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AAVタイターが低い主な原因

Dec 25 , 2025
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1️⃣ プラスミド・設計の問題

  • 遺伝子サイズが大きすぎる（4.7 kb超）

  • ITRの欠損・変異

  • プロモーター／polyAが不適切

👉 対策：

・全長を再計算（ITR含む）

・ITRシーケンスを必ず確認

2️⃣ トランスフェクション効率が低い

  • 細胞密度が合っていない

  • トランスフェクション試薬・比率が不適切

  • プラスミドの品質（Endotoxin高）

👉 対策：

・HEK293Tの状態を最優先で最適化

・高純度プラスミドを使用

3️⃣ パッケージング条件の問題

  • 3プラスミド比率が不適切

  • 血清型とターゲット遺伝子の相性が悪い

👉 対策：

・血清型別の最適条件を使用

・経験値のあるプロトコルに合わせる

4️⃣ 回収・精製ロス

  • 回収タイミングが早すぎ／遅すぎ

  • 精製工程でのウイルス損失

👉 対策：

・通常は72時間前後で回収

・精製法（iodixanol / カラム）を再確認

5️⃣ 測定方法の影響

  • qPCR条件が最適でない

  • 標準DNA・プライマー設計ミス

👉 対策：

・測定系を必ずコントロール付きで検証

・物理力価と感染力価は別物と理解

AAVタイター低下の多くは「設計・細胞・条件・測定」のどこかに原因があります。
1つずつ切り分けて確認するのが近道です。

PackGeneについて

PackGene Biotech is a world-leading CRO and CDMO, excelling in AAV vectors, mRNA, plasmid DNA, and lentiviral vector solutions. Our comprehensive offerings span from vector design and construction to AAV, lentivirus, and mRNA services. With a sharp focus on early-stage drug discovery, preclinical development, and cell and gene therapy trials, we deliver cost-effective, dependable, and scalable production solutions. Leveraging our groundbreaking π-alpha 293 AAV high-yield platform, we amplify AAV production by up to 10-fold, yielding up to 1e+17vg per batch to meet diverse commercial and clinical project needs. Moreover, our tailored mRNA and LNP products and services cater to every stage of drug and vaccine development, from research to GMP production, providing a seamless, end-to-end solution.

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