Q1:AAV はどの温度で保存すべきですか?
A:–80 °C での保存を推奨します。
–80 °C は長期保存において最も安定しており、ウイルス滴度や感染活性を最大限維持できます。
–20 °C での保存は長期間では活性低下のリスクがあるため推奨されません。
Q2:凍結保存前に特別なバッファーは必要ですか?
A:適切な保存バッファーを使用することが重要です。
安定した凍結保存バッファーの例:
-
PBS または Tris 緩衝液(pH 7.2–7.5)
-
低濃度の吸着防止剤(Pluronic F-68 など)
-
in vivo 実験や高要求条件では、トレハロースや低濃度グリセロールの添加も推奨
高塩濃度や強力な界面活性剤、成分不明のバッファーは避けてください。
Q3:AAV を凍結融解(フリーズ・スロー)してもよいですか?
A:反復凍結融解は避けてください。
AAV は凍結融解に敏感で、繰り返すと滴度や感染効率が低下します。
単回使用量ごとに分装し、解凍後は一度で使用することが望ましいです。
Q4:AAV の解凍時に注意すべきことは?
A:迅速で丁寧な解凍を行ってください。
-
軽く吹き混ぜる程度にし、強く振とうしない
-
解凍後は当日中に使用することが望ましい
Q5:AAV を凍結保存する際のチューブは?
A:低吸着(Low-binding)チューブを使用してください。
通常のプラスチックチューブではウイルスが壁面に吸着し、実際に使用可能な滴度が低下することがあります。特に少量や高濃度の場合に顕著です。
Q6:AAV 凍結保存が不適切だとどうなりますか?
A:以下の問題が発生する可能性があります。
-
有効滴度の低下
-
感染効率の低下
-
実験結果のばらつき
-
in vivo 実験での効果不安定
PackGeneについて
PackGene Biotech is a world-leading CRO and CDMO, excelling in AAV vectors, mRNA, plasmid DNA, and lentiviral vector solutions. Our comprehensive offerings span from vector design and construction to AAV, lentivirus, and mRNA services. With a sharp focus on early-stage drug discovery, preclinical development, and cell and gene therapy trials, we deliver cost-effective, dependable, and scalable production solutions. Leveraging our groundbreaking π-alpha 293 AAV high-yield platform, we amplify AAV production by up to 10-fold, yielding up to 1e+17vg per batch to meet diverse commercial and clinical project needs. Moreover, our tailored mRNA and LNP products and services cater to every stage of drug and vaccine development, from research to GMP production, providing a seamless, end-to-end solution.