vg/mL(vector genomes per milliliter)は、アデノ随伴ウイルス(AAV)などのウイルスベクターで広く使用されるウイルス力価(titer)単位であり、1 mLあたりに含まれるウイルスゲノム(vector genome)のコピー数を示します。
ここでいう「vg」は感染能を持つウイルス粒子数ではなく、ウイルスゲノム配列のコピー数を意味します。
vg/mLの意味
- vg(vector genome):ウイルスゲノム1コピー分
- mL(ミリリットル):溶液1 mLあたり
例えば:
- 1 × 10¹² vg/mL → 1 mL中に約1兆個(10¹²)のウイルスゲノムが存在することを示す
- 5 × 10¹³ vg/mL → 1 mL中に約50兆個(5 × 10¹³)のウイルスゲノムが存在することを示す
vg/mLの測定方法
主に以下の方法で測定されます:
- qPCR(定量PCR)
- ddPCR(デジタルPCR)
これらの方法では、WPRE、ITR、PolyA、目的遺伝子などの特定配列をターゲットにして、ゲノムコピー数を定量し、最終的にvg/mLとして換算します。
- qPCR:迅速かつコスト効率が高く、一般的に広く使用される
- ddPCR:標準曲線が不要で、より高い精度と再現性を持つため近年利用が拡大している
vg/mLと他の力価単位との違い
| 単位 | 正式名称 | 示す内容 | 主な用途 |
| vg/mL | vector genomes per milliliter | ウイルスゲノム数 | AAVで最も一般的 |
| GC/mL | genome copies per milliliter | ゲノムコピー数 | vg/mLとほぼ同義 |
| TU/mL | transducing units per milliliter | 実際に細胞を形質導入できる粒子数 | レンチウイルスなど |
| PFU/mL | plaque-forming units per milliliter | プラーク形成能を持つウイルス数 | アデノウイルス等 |
| IU/mL | infectious units per milliliter | 感染能を持つウイルス単位 | 一部ウイルス |
なぜAAVではvg/mLが使われるのか
AAVでは主に以下の理由からvg/mLが標準指標として用いられます:
- プラーク形成を行わないためPFUが適用できない
- 感染活性(TU)は細胞種・血清型・投与条件に強く依存し標準化が難しい
- qPCR/ddPCRによるゲノム定量は再現性が高く、異なる実験間でも比較しやすい
そのため、vg/mLはAAVの標準的な力価指標として広く用いられています。
注意点
vg/mLはウイルスの「量」を示す指標であり、感染性(機能性)を直接反映するものではありません。同じvg/mLであっても、以下の要因により実際の遺伝子導入効率は異なる場合があります:
- 空カプシド(empty capsid)の割合
- ゲノム完全性
- 血清型およびカプシド特性
- 精製純度
- 保存・取り扱い条件
そのためAAV評価では、vg/mLに加えて、空/満カプシド比、感染実験データ、純度などを総合的に評価することが重要です。
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