AAV（アデノ随伴ウイルス）を用いた実験では、「ウイルス力価は十分に高いか？」という点がよく注目されます。

そのため、

「AAVは力価が高いほど品質が良い」

と考えてしまうことがあります。

しかし、これは必ずしも正しいとは限りません。

AAVの力価が高いことは、サンプル中で検出されるベクターゲノムやカプシドの量が多いことを示しますが、高力価であることが、そのまま高品質や高い生物学的活性を意味するわけではありません。

AAVの品質を評価する際には、力価だけでなく、カプシド組成、ベクターゲノムの完全性、純度、機能活性などを総合的に確認する必要があります。

1．まず確認したいのは「その力価は何を測定しているのか？」

AAVの品質評価では、主にベクターゲノム力価（vector genome titer、VG力価）とカプシド力価（capsid titer）が用いられます。

VG力価は、サンプル中に存在するベクターゲノムの量を示す指標で、一般的にvg/mLやGC/mLなどの単位で表されます。

一方、カプシド力価はAAVカプシド粒子の量を示す指標です。

ここで重要なのは、

「カプシドが多い＝完全なAAV粒子が多い」ではない

という点です。

AAV製造では、完全なベクターゲノムを含む粒子だけでなく、ゲノムを含まないempty capsidや、不完全なゲノムを含むpartial capsidなどが存在する可能性があります。

そのため、「1×10¹³ vg/mL」という数値だけを見てAAVの品質を判断することはできません。

2．なぜ「高力価＝高品質」とは限らないのか？

完全なベクターゲノムを含む粒子の割合も重要

AAVの製造工程では、すべてのカプシドが目的のベクターゲノムを正しくパッケージングするとは限りません。

最終的なAAVサンプルには、例えば以下のような粒子が含まれる可能性があります。

• Full capsid：目的のベクターゲノムを含む粒子
• Empty capsid：ベクターゲノムを含まない粒子
• Partial capsid：不完全なベクターゲノムなどを含む粒子

したがって、単純に「粒子数が多い」「VG力価が高い」という理由だけで、AAV製品全体の品質が高いと判断するのは適切ではありません。

AAVを評価する際には、どのような粒子が含まれているのか、そしてベクターゲノムが適切な状態で存在しているのかを確認することが重要です。

3．高力価でもFull/Emptyのバランスには注意が必要

例えば、2つのAAVロットがあるとします。

Aロット：VG力価は高いものの、empty capsidやpartial capsidなどが多い。

Bロット：VG力価はAロットよりやや低いものの、粒子組成、純度、ベクターゲノムの完全性などが良好。

この場合、「Aのほうが力価が高いから品質も高い」と単純に判断することはできません。

AAVでは、

「どれだけ多いか」だけでなく、「何が入っているのか」

を見ることが重要だからです。

4．検出方法によってもAAV力価の数値は変わる

AAVの力価は、測定方法やサンプル前処理などによって結果が変動する場合があります。

例えば、

• qPCRとddPCRでは測定原理が異なる
• 使用するプライマーやプローブの位置が異なる
• サンプル前処理の条件が異なる
• 検出対象となる領域が異なる
• サンプルマトリックスや不純物の影響を受ける可能性がある

といった要因があります。

そのため、異なる測定方法で得られた力価を、そのまま単純比較することには注意が必要です。

特にAAVのロット間比較を行う場合は、できるだけ測定方法や前処理条件を統一し、再現性のある分析方法を使用することが重要です。

5．AAVで本当に見るべきなのは「力価＋品質＋機能」

では、AAVの品質を評価するときには何を確認すればよいのでしょうか？

簡単に整理すると、

力価：どれくらい存在するか

品質：何が含まれているか

機能：期待した生物学的作用を示すか

という3つの視点で考えることができます。

代表的な評価項目としては、以下が挙げられます。

つまり、AAVの評価は単一の力価ではなく、複数の品質属性を組み合わせて判断することが重要です。

6．では、力価が低いほうが良いの？

もちろん、そういう意味ではありません。

「高力価＝高品質とは限らない」ということは、

「低力価のAAVのほうが良い」

という意味ではありません。

AAVの力価が低すぎる場合、目的の投与量や実験条件を満たすために、より多くのウイルス液を使用する必要が生じる可能性があります。

そのため、重要なのは単純に最高力価を目指すことではなく、

研究目的に適した力価と、安定した品質・純度・機能活性をバランスよく確保すること

です。

7．AAVの「高力価」を見るときに確認したい7つのポイント

AAVの製品仕様や検査結果を見るときは、単純に力価の数字だけを見るのではなく、以下の点も確認してみましょう。

① その力価は何の力価なのか？VG力価なのか、カプシド力価なのか。

② どの測定方法を使用しているのか？qPCR、ddPCRなど、測定方法を確認する。

③ Full / Empty / Partialの状態はどうなっているのか？

④ ベクターゲノムは適切な状態なのか？

⑤ 純度はどうなのか？HCP、残留DNA、エンドトキシンなどを確認する。

⑥ 機能活性に関するデータはあるのか？

⑦ ロット間の一貫性は確保されているのか？

「どのAAVの力価が一番高いか」だけではなく、これらの情報を組み合わせて評価することが重要です。

PackGeneではどのようなAAVサービスを提供できる？

AAVプロジェクトでは、「力価が高いかどうか」だけでなく、研究目的、投与方法、必要な用量、品質要件などを踏まえてAAV製品を設計・製造することが重要です。

PackGeneでは、AAVの研究開発から前臨床・臨床開発に向けた各段階のニーズに対応し、ベクターデザイン・プラスミド構築、AAVパッケージング、精製、品質分析、各種グレードのAAV製造まで、一貫したサービスを提供しています。

主なサービスには以下が含まれます。

• AAVベクターデザイン・プラスミド構築：GOI、プロモーター、血清型、研究目的などに応じたベクター設計・構築
• AAVパッケージングサービス：各種AAV血清型・カプシドに対応したAAV製造
• AAV精製サービス：研究目的やプロジェクト要件に応じたAAV精製
• AAV品質分析サービス：AAV力価、カプシド関連指標、純度などの各種品質評価
• NHP Grade AAV：非ヒト霊長類（NHP）を含む動物実験向けAAV
• GMP AAVサービス：臨床前開発およびその後の開発段階に向けたGMP対応AAV製造支援

AAVプロジェクトでは、高力価だけを追求するのではなく、力価、粒子組成、ベクターゲノム完全性、純度、機能活性、ロット間一貫性などを総合的に評価することが重要です。

AAVのパッケージング、動物実験、品質分析などを検討されている場合は、GOI、使用予定の血清型、投与方法、必要な用量などのプロジェクト情報に基づいて、適切なAAV製造・品質分析プランをご相談いただけます。