AAV パッケージング – 研究グレード
- プラスミド抽出からウイルスまで最短12日で対応
- 高純度、低エンドトキシン、低エンプティシェル率
- 70種類以上のセロタイプと50,000件以上のプロジェクトで培った専門的サポート
主な利点
-
迅速な納品
AAV 5E+13GCの場合、12～15営業日 -
保証力価
≥1E+13GC/mL（qPCRゲノムコピー数/ml） -
高純度
SDS-PAGEで分析 -
高収率
最大1E+16GC -
低エンドトキシン
<10EU/ml、生体内実験に適しています -
低エンドトキシン
<30% -
複数の血清型
70種類以上の血清型オプションをご用意 -
豊富な経験
10,000件以上のカスタムAAVプロジェクトを納品 -
経験豊富なテクニカルサポート
長年のAAV経験を持つ博士レベルのチーム
サービスの詳細
価格と納期
*記載された力価は、インサートがパッケージング容量（4.7 kb）を超える場合、またはご自身で改変した rep/cap プラスミドもしくはヘルパープラスミドを当社に提供される場合を除き、保証されます。
| AAV Packaging Serotypes | Guarantoed Yield (GC)* | Lead Time (Business Days) |
|---|---|---|
| Normal-yield AAV Serotypes | 2E+12 GC | 12-15 Days |
| 5E+12 GC | ||
| 1E+13 GC | ||
| 2E+13 GC | ||
| 5E+13 GC | ||
| 1E+14 GC | ||
| 2E+14 GC | 18-24 Days | |
| 5E+14 GC | ||
| 1E+15 GC | 30-45 Days | |
| 2E+15 GC | ||
| Low-yield AAV Serotypes (AAV4, 6, etc.) | 2E+12 GC | 12-15 Days |
| 5E+12 GC | ||
| 1E+13 GC | ||
| 2E+13 GC | ||
| 5E+13 GC | ||
| 1E+14 GC | 18-24 Days | |
| 2E+14 GC | ||
| 4E+14 GC |
- GC＝ゲノムコピー数（Genome copies）。
- 生産データのない極めて収量の低い AAV 血清型については、ここに記載された最終収量または力価を保証することはできません。
- 現在特許に係る AAV 血清型 を使用され、かつご応用が商業目的である場合、事前に特許所有者に連絡して許可を得ることをお勧めします。
保存要件:
- ウイルスは - 80℃で保存し、操作中は氷上に置いてください。
- 予想使用量を事前に計算し、ご要望に応じてウイルスを分注してください。これにより、受領後に不要な解凍と再凍結を避けるのに役立ちます。凍結融解サイクルはウイルスの生存能に影響を与えるためです。分注が必要な場合は、シリコン処理された内壁を持つ PCR チューブ、またはタンパク質結合率の低い特殊なウイルス保存チューブの使用を推奨します。
- 使用直前に、分注したウイルスを氷浴で融解してください。
- 必要に応じて PBS または PBS/0.001% F - 68 で希釈してください。
品質管理
PackGene の経験豊富な QC チームによって、多様な AAV ベースの QC アッセイ が開発されています。QC 試験は、in vitro および in vivo 研究の両方における AAV ウイルス粒子 の同一性、純度、および力価の検証を目的としています。AAV ゲノムコピー数は、力価較正のため ATCC の標準 AAV を用いた SYBR qPCR によって定量されます。純度は SDS - PAGE とクーマシーブルー染色によって決定されます。
当社は、AAV 粒子のエンドトキシンレベルが 10 EU/mL 未満であることを保証します。また、ddPCR、TEM、TCID50 力価測定などの追加 QC 試験やその他の QC サービスも提供しています。詳細については、AAV 分析サービスをご確認ください。
| Category | QC Assays | QC Standard |
|---|---|---|
| Identity | Identity – GOI Sequence | Additional QC |
| Purity | SDS-PAGE Coomassie Blue Staining | Free QC |
| TEM | Additional QC | |
| AUC | Additional QC | |
| Potency & Content | qPCR | Free QC |
| ddPCR | Additional QC | |
| TCID50 | Additional QC | |
| Capsid Titer-ELISA | Additional QC | |
| Impurity | Endotoxin Test | Free QC |
| Mycoplasma Detection | Additional QC | |
| Sterility Test | Additional QC | |
| Residual Plasmid Test | Additional QC |
パフォーマンス
-
標準的品質管理（Standard QC）
- 複数の制限酵素を用いた制限酵素消化解析により、AAV パッケージングに使用するプラスミドを検証します。
- qPCR（定量のための標準曲線を用いた SYBR Green 法）による AAV 力価測定
注釈：AAV qPCR 力価測定の標準として ATCC VR-1816™が使用されました。- LAL アッセイによるエンドトキシン検査
- SDS-PAGE およびクーマシー染色による AAV 純度分析（要望に応じて銀染色も利用可能）
レーン 2 - 5 および 7：PackGene で生産された AAV サンプル。レーン 1、6：マーカー -
その他利用可能な分析試験（Other Available Analytical Tests）
